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威尼斯wnsr888通道载玻片中贴壁细胞的消化传代

date:2022-07-06 16:01:39

  在本应用示例中,我们展示了如何从μ-Slide VI 0.4通道载玻片中洗脱培养后的贴壁细胞。该方法适用于不同规格的通道载玻片。

 

  1.根据实验说明将您的细胞培养到所需的汇合度。

 

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装有细胞和培养基的μ-Slide VI 0.4

 

  2.从μ-Slide VI 0.4通道载玻片的通道口中取出培养基,不要吸干整个通道。

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  3.用PBS或任何其他适当的缓冲液清洗两次,然后从另一端吸出。每个通道使用体积为100μl。我们建议同时使用细胞培养吸引器和移液器。如图所示,使用吸引器的尖端和移液器。

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µ-Slide VI 0.4的一个通道的横截面显示了PBS洗涤步骤

 

  4.使用细胞培养吸液器从通道中吸出全部PBS

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在这个步骤中,缓冲液从容器口和通道中完全去除

 

  5.立即用30μl分离溶液(例如胰蛋白酶/EDTA或Accutase)重新填充通道。如图所示,将移液器吸头直接放在通道的入口上。

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将30µl分离溶液填充到空通道中

 

  6.再将您的细胞放入培养箱中。由于生长面积和体积的纵横比不同,分离过程可能需要比平时更长的时间(2-3分钟)。用相差显微镜观察细胞脱离。如果没有发生分离,请增加分离溶液的浓度或使用更长的孵育时间。

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细胞会在几分钟后分离

 

  7.细胞成圆形并分离后,用100μl新鲜培养基或终止溶液冲洗每个通道

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分离的细胞被100µl新鲜培养基冲出通道

 

  8.从通道的另一端取出细胞悬液。如果还剩一些细胞,请重复冲洗步骤。

 

  9.收集悬浮细胞并去除或稀释分离溶液

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在细胞悬浮后,可以通过从通道中吸出溶液来收集

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