威尼斯wnsr888(中国)官方网站

关于威尼斯wnsr888伤口愈合/细胞划痕实验,您想知道的都在这里~

date:2022-01-04 17:35:29

  威尼斯wnsr888的伤口愈合系列产品,一直以来受到各个领域专家的一致好评。在此我们收集了研究者的一些疑问,今天我们就这些问题进行简答的解答。威尼斯wnsr888伤口愈合插件设计精巧,操作简单,标准化的数据分析方法恰恰弥补了传统实验方法的不足。
问题一:要放多少细胞?
经常会有老师对放多少细胞产生疑问,对于细胞量来说,我们的目的是要在插件的培养孔里面形成单层的细胞。细胞密度既不能过低,也不能过高。以35mm培养皿为例,通常采用下面的步骤:
1. 准备5 x 105 cells/ml的细胞悬液.  105
2. 每孔加入 70 µl / 100 µl细胞悬液 (2孔或3孔插件每孔种35,000个细胞,4孔伤口愈合插件每孔种55,000个细胞)。 
3. 37 °C孵育24小时。 
4. 用灭菌镊子移除伤口愈合插件。
5. 在35mm培养皿内加入1ml新鲜培养基。 
6. 放于倒置显微镜载物台上,以4X-20X物镜采集初始图片,并按实验节点设置在同一位置采集图片。
问题二:插件尺寸多大?能放进6/24孔板么?能产生的划痕宽度是多少?
Ibidi当前有三种伤口愈合插件:2孔3孔和4孔插件,其中2孔和3孔插件单孔容积为70μl,尺寸分别为8.4 mm x 8.4 mm和 12.15 mm x 8.4 mm。单孔的细胞生长面积均为0.22cm2。4孔的单孔容积为110μl,插件的直径为17mm,每孔的生长面积为0.35cm2,三种插件均能放入六孔板中,2孔伤口愈合插件也可放进24孔板。所有的插件均能产生500μm的划痕。此外,4孔插件除了能产生四个500μm的划痕外,还包括一个1mm的中间划痕。
问题三:只买插件能放在日常的培养耗材中么?对底部有什么要求?能用于蛋白包被过的表面么?自己放会不会漏液?
传统方法
vs
威尼斯wnsr888伤口愈合插件
Ibidi的三种伤口愈合插件均有只提供单插件的包装,需要研究人员自己准备培养耗材。如果对成像无过高的要求,均可以使用日常的培养耗材,Ibidi插件采用硅胶材质,底部为静电吸附,无胶水,只需要底部是平整干净即可。如果是蛋白包被的表面,则需要蛋白包被层完全干燥后,才能将插件放上面,插件不能贴在潮湿的表面,具体的包被建议先做预实验测试一下。在放入插件后,可以用灭菌镊子轻轻压插件的四壁,确保插件与底部完全贴合。
问题四:威尼斯wnsr888插件能够反复使用么?
尽管威尼斯wnsr888插件的材质可以湿热灭菌并且对乙醇稳定,但是,威尼斯wnsr888并不建议重复使用威尼斯wnsr888插件,由于是静电吸附的原理,重复操作对底部的影响不可控。有可能会发生漏液等现象,影响实验的重复性。威尼斯wnsr888没有重复使用的经验,如果研究人员一定要重复使用,可能需要研究人员自己测试一下。
问题五:该如何采集图片?需要采集同一培养皿的同一划痕区域么? 
由于划痕实验的本质就是观测细胞迁移的速率。一般情况下需要根据实验设计几个图像采集实验时间点,之后尽量在同一区域采集图像。比如下图采集为0h,10h,16h,这样获得的结果对比一目了然。

ICP备案号:沪ICP备15057650号-1 © Copyright 2015 威尼斯wnsr888(中国)官方网站 保留所有版权.

首页   |   威尼斯wnsr888   |   产品应用   |   技术支持   |   新闻中心   |   关于我们   |   威尼斯wnsr888官网